Projet, rapport de stage, et mémoire de fin d’études ETUDE CHIMIQUE ET TOXICOLOGIQUE DES EXTRAITS DE FEUILLES D’Albizia boinensis (FABACEAE) en PDF
Extrait hydroéthanolique :
Un gramme de poudre de végétale ou de résidu à sec de l’extrait à tester est repris dans 10ml du mélange hydroéthanolique à 80% (80 ml d’éthanol + 20 ml d’eau distillée).
Après une nuit de macération, le mélange est filtré et on obtient l’extrait hydroéthanolique.
– Extrait acide :
La poudre ou le résidu d’évaporation à sec de l’extrait à tester, pesant 1g, est laissé macérer pendant une nuit dans 10 ml d’acide chlorhydrique (HCl) 12N. Le liquide obtenu après filtration du macérat est l’extrait acide.
– Extrait chloroformique :
Un gramme de poudre de feuilles ou de résidu d’évaporation à sec de l’extrait à étudier est délayé dans 10 ml de chloroforme. Le mélange est laissé macérer pendant une nuit puis filtré sur du coton pour avoir l’extrait chloroformique.
Guide du mémoire de fin d’études avec la catégorie BIOCHIMIE APPLIQUEE AUX SCIENCES MEDICA |
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Table des matières
DEDICACE
REMERCIEMENTS
TABLE DES MATIERES
LISTE DES ABREVIATIONS
GLOSSAIRE
LISTE DES TABLEAUX
LISTE DES FIGURES
INTRODUCTION GENERALE
Première partie : ETUDE CHIMIQUE
1. INTRODUCTION
2. MATERIELS ET METHODES
2.1. MATERIELS
2.1.1. LE MATERIEL VEGETAL
2.1.1.1. Classification de la plante (Du PUY et coll., 2002)
2.1.1.2. Identification de la plante
2.1.1.3. Description botanique
2.1.1.4. Distribution géographique de l’espèce Albizia boinensis
2.1.1.5. Date et lieu de récolte
2.1.1.6. Préparation et conservation du matériel végétal
2.1.2. LES PRODUITS CHIMIQUES
2.2. METHODES
2.2.1. METHODES D’EXTRACTION DES PRINCIPES TOXIQUES
2.2.1.1. Extraction à froid
2.2.1.2. Extraction à chaud
2.2.2. METHODES DE PURIFICATION
2.2.2.1. Traitement par la chaleur
2.2.2.1.1. Principe
2.2.2.1.2. Mode opératoire
2.2.2.2. Fractionnement par l’acétate d’éthyle
2.2.2.2.1. Principe
2.2.2.2.2. Mode opératoire
2.2.2.3. Fractionnement par le n-butanol
2.2.2.3.1. Principe
2.2.2.3.2. Mode opératoire
2.2.2.4. Dialyse
2.2.2.4.1. Principe
2.2.2.4.2. Mode opératoire
2.2.2.5. Traitement par l’acétate neutre de plomb (ANP)
2.2.2.5.1. Principe
2.2.2.5.2. Mode opératoire
2.2.2.6. Chromatographie sur gel Sephadex G 25
2.2.2.6.1. Principe
2.2.2.6.2. Mode opératoire
2.2.2.6.3. Régénération du gel
2.2.2.6.4. Conservation du gel
2.2.3. METHODE DE CONCENTRATION
2.2.4. CALCUL DU RENDEMENT
2.2.5. METHODES D’ANALYSE
2.2.5.1. Chromatographie sur couche mince
2.2.5.1.1. Principe
2.2.5.1.2. Mode opératoire
2.2.5.2. Criblage phytochimique
2.2.5.2.1. Préparation des extraits à tester
2.2.5.2.1.1. Extrait aqueux
2.2.5.2.1.2. Extrait hydroéthanolique
2.2.5.2.1.3. Extrait acide
2.2.5.2.1.4. Extrait chloroformique
2.2.5.2.2. Méthodes de détection des familles chimiques
2.2.5.2.2.1. Détection des alcaloïdes
2.2.5.2.2.1.1. Test de MAYER
2.2.5.2.2.1.2. Test de WAGNER
2.2.5.2.2.1.3. Test de DRAGENDORFF
2.2.5.2.2.2. Détection des flavonoïdes (Test de WILSTATER)
2.2.5.2.2.3. Détection des leucoanthocyanes (Test de BATE-SMITH)
2.2.5.2.2.4. Détection des tanins et polyphénols
2.2.5.2.2.4.1. Test à la gélatine
2.2.5.2.2.4.2. Test à la gélatine salée
2.2.5.2.2.4.3. Test au chlorure ferrique
2.2.5.2.2.5. Détection des stéroïdes et triterpènes
2.2.5.2.2.6. Détection des désoxyoses (Test de KELLER-KILIANI)
2.2.5.2.2.7. Détection des irridoïdes
2.2.5.2.2.8. Détection des anthraquinones (Test de BORNSTRÄGER)
2.2.5.2.2.9. Détection des saponines (Test de mousse)
3. RESULTATS
3.1. EXTRACTION
3.1.1. EXTRACTION A FROID
3.1.1.1. Extraction aqueuse
3.1.1.2. Extraction hydroéthanolique
3.1.2. EXTRACTION A CHAUD
3.1.2.1. Extraction aqueuse
3.1.2.2. Extraction hydroéthanolique
3.2. PURIFICATION
3.2.1. Traitement par la chaleur
3.2.2. Fractionnement par l’acétate d’éthyle
3.2.3. Fractionnement par le n-butanol
3.2.4. Précipitation par l’acétate neutre de plomb
3.2.5. Dialyse
3.2.6. Chromatographie sur gel Sephadex G25
3.2.7. ANALYSE DES EXTRAITS PAR CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE
3.4. RENDEMENT
3.5. CARACTERISATION CHIMIQUE
3.5.1. PROPRIETES PHYSICO-CHIMIQUES
3.5.2. NATURE CHIMIQUE
4. DISCUSSION ET CONCLUSION
Deuxième partie : ETUDE TOXICOLOGIQUE
1. INTRODUCTION
2. MATERIELS ET METHODES
2.1. MATERIELS
2.1.1. LES ANIMAUX D’EXPERIMENTATION
2.1.1.1. Les souris
2.1.1.2. Les hématies de mouton
2.1.1.3. Les larves de moustique
2.1.1.4. Les têtards de grenouille
2.1.1.5. Les poissons
2.1.2. LES VEGETAUX D’EXPERIMENTATION
2.1.3. LES MICROORGANISMES ET LES MILIEUX DE CULTURE
2.1.3.1. Les microorganismes
2.1.3.2. Les milieux de culture
2.1.4. LES DISQUES POUR LES TESTS D’ANTIBIOGRAMME
2.2. METHODES
2.2.1. METHODES D’ETUDE DES EFFETS SUR LES ANIMAUX
2.2.1.1. Test sur souris
2.2.1.1.1. Estimation de la toxicité
2.2.1.1.2. Détermination de la DL50
2.2.1.2. Test hémolytique sur les hématies de mouton
2.2.1.2.1. Principe
2.2.1.2.2. Mode opératoire
2.2.1.3. Test sur les animaux à sang froid
2.2.1.3.1. Principe
2.2.1.3.2. Mode opératoire
2.2.2. METHODES D’ETUDE DES EFFETS SUR LES VEGETAUX
2.2.2.1. Etude des effets sur le pouvoir germinatif des graines
2.2.2.2. Etude des effets sur la croissance des jeunes plantules
2.2.2.2.1. Principe
2.2.2.2.2. Mode opératoire
2.2.2.2.2.1. Trempage
2.2.2.2.2.2. Germination
2.2.2.3. Etude des effets sur la croissance des bourgeons axillaires
2.2.2.3.1. Principe
2.2.2.3.2. Mode opératoire
2.2.3. METHODES D’ETUDE DES EFFETS SUR LES MICROORGANISMES
2.2.3.1. Stérilisation
2.2.3.2. Coloration Gram
2.2.3.3. Tests d’activité antimicrobienne
2.2.3.3.1. Principe
2.2.3.3.2. Test proprement dit
2.2.3.4. Détermination de la CMI
2.2.3.4.1. Détermination de la CMI par la méthode des disques en milieu solide
3. RESULTATS
3.1. EFFETS SUR LES ANIMAUX
3.1.1. EFFETS SUR LES ANIMAUX A SANG CHAUD
3.1.1.1. Effets de l’extrait brut sur la souris
3.1.1.1.1. Description des symptômes d’intoxication
3.1.1.1.2. Détermination de la DL50 (24h)
3.1.1.2. Pouvoir hémolytique des extraits
3.1.2. EFFETS DE L’EXTRAIT BRUT SUR LES ANIMAUX A SANG FROID
3.1.2.1. Effets de l’extrait brut sur les têtards de grenouille
3.1.2.2. Effets de l’extrait brut sur les alevins de carpe
3.1.3. Effets de l’extrait brut sur les larves de moustique
3.2. EFFETS DES EXTRAITS SUR LES VEGETAUX
3.2.1. Effets de l’extrait brut sur le pouvoir germinatif des graines
3.2.2. Effets de l’extrait brut sur la croissance des jeunes plantules
3.2.3 Effets de l’extrait brut et de l’extrait E3 sur le développement des bourgeons axillaires
3.3. EFFETS DES EXTRAITS SUR LES MICROORGANISMES
3.3.1. Activité antimicrobienne des extraits
4. DISCUSSION ET CONCLUSION
CONCLUSION GENERALE ET PERSPECTIVES
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
ANNEXES
RESUME
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