Isolement de l’ADN normal à partir des leucocytes

Table des matières

LISTE DES ABREVIATIONS
LISTE DES FIGURES
LISTE DES TABLEAUX
LISTE DES ANNEXES
LIEU DE STAGE
INTRODUCTION
REVUE BIBLIOGRAPHIQUE
I.Histoire des acides nucléiques
II.L’ADN circulant
III. biopsie liquide
I.Source des ADN circulants
V.Caractéristiques générales des acides nucléiques circulants
VI.ADN circulant dans les pathologies autres que le cancer
VII. L’intérêt de la recherche d’ADN circulant
1) La détection des altérations géniques
2) La détection des stades de cancer
3) Le suivi et la surveillance des récurrences
4) L’évaluation de la réponse au traitement
VIII. Avantages d’ADN circulant
MATERIEL ET METHODES
Etapes pré analytiques pour l’extraction de l’ADNc
Méthodes d’extraction
1) Isolement de l’ADN normal à partir des leucocytes
Principe
Protocole
2) L’isolement de l’ADNc
I.Principe
II.Protocole
III. Dosage Méthodes de quantification de l’ADNc
IV.PCR = Technique d’amplification en chaine par polymérase
1) Principe de base d’une PCR
2) Choix du gène de référence
3) Choix des amorces
4) Protocole
Analyse d’ADN par électrophorèse sur gel d’agarose
RESULTATS ET DISCUSSION
I.L’extraction de l’ADNc
1) Essai No1
2) Essai No2
3) Essai No3
4) Essai No4
II.L’amplification du gène BRCA1
III. Utilités cliniques potentielles de l’ADN tumoral circulant
CONCLUSION ET PERSPECTIVES
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES