Animaux d’expérimentation
Des souris de race SWISS âgées de 6 à 8 semaines, pesant entre 25 et 29 grammes sans distinction de sexe ont été utilisées pour étudier l’activité de l’extrait RSA-17. Elles ont été élevées à l’animalerie du Laboratoire de Pharmacologie Générale, de Pharmacocinétique et de Cosmétologie (Faculté des Sciences, Université d’Antananarivo), avec une alternance de lumière et d’obscurité de 12 / 12 heures, et à la température de 25°C environ. Les animaux ont été nourris avec 2 g de provende « LFL 14-20 » et ont eu de l’eau à volonté. Lors des tests, ils ont été répartis en 4 lots dont 1 lot témoin, et 3 lots traités respectivement avec la crème, le gel et le masque contenant 10 % de l’extrait RSA-17. Vingt-quatre heures avant les tests, une zone de 6 cm2 au niveau scapulaire de chaque souris a été épilée avec de la cire épilatoire tiède et d’une bandelette dépilatoire (SACHDEVA et coll., 2011), puis nettoyée avec le l’eau savonneuse.
Effet de l’extrait RSA-17 sur la formation des rides
L’effet de l’extrait sur la formation des rides, provoquées expérimentalement, est estimé avec la longueur des plis qui se forment au niveau de la partie dorsale des souris traitées avec l’extrait préparé sous forme de crème, de gel et de masque après l’exposition aux rayons UV. Au départ, la peau des souris ne présente aucune ride, et l’exposition aux rayons UV provoque des ridules sur la peau exposée (Figure 7), et l’application de RSA-17 sous forme de masque, de crème et de gel prévient la formation de ces ridules. La longueur des plis observés chez les animaux traités avec le masque est la plus faible, ensuite celle des animaux traités avec la crème, et enfin, celle des animaux traités avec le gel. Au bout de 24 jours, la longueur des plis observés chez les témoins est égale à 20,7 ± 0,6 mm, contre 3,61 ± 0,4 mm chez les souris traitées avec le masque ; 5,52 ± 1,2 mm chez les souris traitées avec la crème et 11,35 ± 1,22 mm chez les souris traitées avec le gel (P<0,05) (Figure 8).
Tolérance oculaire de l’extrait RAS-17
Une heure après l’application de la crème dans le sac conjonctival de l’œil du lapin, on observe une légère conjonctivite et un léger larmoiement. Deux heures après, la paupière est légèrement gonflée, et après 3 heures, un larmoiement humidifie la paupière, les cils et les poils avoisinant autour de l’œil. Ces irritations disparaissent 24 heures après l’application. L’application du gel dans le sac conjonctival du lapin provoque une conjonctivite qui se traduit par une rougeur, une dilatation des vaisseaux sanguins oculaires, un larmoiement humidifiant la paupière et les poils avoisinants la paupière. Deux heures après l’application, la paupière est légèrement gonflée. Ces irritations disparaissent 48 heures après l’application. Enfin, l’application du masque dans le sac conjonctival du lapin provoque une légère conjonctivite, avec un léger larmoiement, un léger gonflement de la paupière, et une dilatation de vaisseaux oculaires. Ces signes disparaissent au bout de 24 heures. Toutefois, les yeux de chaque lapin réagissent normalement à la lumière et ni l’iris ni la cornée n’a été atteint.
DISCUSION
A la suite des enquêtes ethnobotaniques effectuées dans la région d’Analamanga, nous avons sélectionné les fruits d’une plante, dont le jus est appliqué par les gens sur les jambes et les bras. D’après leur dire, ce jus rend la partie traitée lisse et bien hydratée. Notre travail consiste à étudier l’activité de ce jus de fruit, et nous avons choisi la souris comme modèle expérimental. En cosmétologie, il est préférable d’avoir une gamme complète, c’est pour cela que nous avions préparé un masque, une crème et un gel à partir de ce jus que nous avions codé RAS-17. D’après les résultats que nous avions obtenus, l’application de la crème, du masque et de gel contenant RSA-17 diminue la longueur des rides provoquées par l’exposition aux rayons UV. Les rayons UV provoquent la formation d’ion superoxyde au niveau de la peau qui endommagent les kératinocytes, les fibroblastes ainsi que la couche basale. La destruction des fibroblastes entraine la baisse de la rétention d’eau au niveau du derme, à l’origine de l’affaissement de la peau et la formation des rides. Or les fibroblastes synthétisent les collagènes et les glycosaminoglycanes responsables du maintien d’eau au niveau du derme et les élastines qui procurent à la peau sa souplesse et son élasticité. Des dommages à leur niveau provoqueront une perte d’élasticité et l’apparition des rides. La détérioration de la couche basale réduit la production des différentes cellules cutanées, à l’origine du ralentissement du renouvellement cellulaire et de la baisse de l’hydratation cutanée. En outre, la diminution du nombre de fibroblastes et la détérioration des kératinocytes entrainent l’affaissement cutané, l’amincissement de la peau et l’apparition de ridules (DEFRAIGNE J.O. et PINCEMAIL J., 2007). L’application de l’extrait sous forme de crème, de gel ou de masque réduit la longueur des rides au niveau de la surface de la peau des souris. Cette activité pourrait être due à une activité anti radicalaire de RSA-17. Les composés phénoliques et les polysaccharides présents dans RSA-17 neutraliseraient les radicaux libres par don d’électron, ou inhiberaient l’oxydation, préviendraient la formation de radicaux libres en agissant en tant qu’adsorbant ou en augmentant la production de mélanine cutanée (KAHKONEN M.P. et coll., 1999). Les alcaloïdes et les stéroïdes présents dans l’extrait possèderaient une activité anti-âge et antiradicalaire ce qui explique la diminution de la formation de ride. Des triterpènes sont connus pour leur rôle dans la prolifération et l’augmentation de la production de collagène assurant le maintien de l’hydratation de la peau (HAFTEK M. et coll., 2008), ce qui expliquerait l’activité de RSA-17 à augmenter l’hydratation et l’épaisseur de la peau. Les composés phénoliques piègent les radicaux libres, et inhibent ainsi la dégradation des cellules constitutives de la peau, ils empêchent aussi le stress oxydatif, ce qui leur confère la propriété anti-âge (LEE K.-K. et coll., 2002). Les tanins sont des bons piégeurs de radicaux libres, et possèdent ainsi une forte activité antioxydante (BADIAGA M., 2012), leur présence dans RSA-17 leur permettrait de protéger la peau contre l’agression par le rayon UV et retarder la formation des rides. Comme ce sont des grosses molécules, elles exerceraient leurs fonctions sur la surface cutanée. De plus, elles protègeraient la peau contre les brûlures engendrés par les rayons UV, permettraient la prolifération des kératinocytes (HERNANDES L., 2010). Par ailleurs, RSA-17 augmente l’hydratation de la peau, qui se traduit par l’augmentation de la capacitance et de l’épaisseur cutanées. L’analyse de ces résultats nous permet d’avancer une hypothèse que RSA-17 possèderait une propriété anti vieillissement cutané, car un produit hydratant atténue les signes du vieillissement cutanée (PASSERON T. et ORTONNE J.-P., 2003). L’application biquotidienne des produits sur la peau des souris augmente la capacitance et l’épaisseur cutanée. Or l’augmentation de la capacitance traduit l’augmentation de l’hydratation cutanée, car la capacité de la peau à conduire le courant électrique est directement liée à son hydratation (PITTET J. C. et BEAU P., 2002 ; KHAZAKA C., 2005). Cela nous permet de dire que RAS-17 hydrate la peau, qu’il soit préparé sous forme de crème, de gel ou de masque. Cette propriété pourrait être due à l’amélioration de la matrice cutanée responsable de son hydratation. Cette amélioration se traduit par la diminution de la PIE (Perte Insensible en Eau). En outre, pour réduire la perte insensible en eau, RSA-17 pourrait renforcer la barrière cutanée en formant une fine couche imperméable au niveau de l’épiderme en tant qu’agent filmogène et occlusif (DARLENSKI R. et coll., 2011). Cela diminue l’évaporation de l’eau et la perte hydrique transépidermique. Il se pourrait aussi que RSA-17 attire et retient l’eau dans l’épiderme en renforçant les NMF (Natural Moisturizing Factor = facteurs d’hydratation naturel), agissant ainsi come un agent humectant (FOWLER J., 2012). L’augmentation de l’épaisseur de la peau peut résulter de plusieurs mécanismes. Les composés phénoliques, ainsi que les alcaloïdes présents dans l’extrait RSA-17 pourraient stimuler la régénération cellulaire, ainsi que la prolifération des fibroblastes, entrainant une hausse de synthèse de collagène, de glysosaminoglycanes, de protéoglycanes et d’acide hyaluronique responsable du maintien de la matrice intracellulaire dermique et de la rétention d’eau. Aussi, la synthèse d’élastine redonnant souplesse à la peau. Il pourrait aussi agir en tant qu’agent restructurant, comblant l’espace entre les fibres et les cellules dermiques conférant une belle texture et un aspect rebondi de la peau (SORRELL J.M. et CAPLAN A.I., 2004). Le criblage phytochimique effectué sur l’extrait RSA-17 a révélé la présence de polysaccharides, d’alcaloïdes, de stéroïdes, de triterpènes, de composés phénoliques, d’anthocyanes et de tanins. Les polysaccharides sont des molécules hydrophiles (NWAOGUIKPE R. N. et coll., 2010), et comme ils sont présents dans l’extrait, nous avançons l’hypothèse qu’ils seraient responsables de la propriété humectant de RSA-17. En plus, les polysaccharides sont dotés d’un pouvoir antioxydant, ils sont également connus pour leurs actions sur la prolifération cellulaire et pour leur rôle anti-âge (ZHANG Y. et coll., 2015). En comparant les effets des trois formulations sur le vieillissement de la peau, le masque est le plus efficace, puis la crème et enfin le gel. Etant donné que les trois formulations contiennent le même actif RSA, mais préparées avec différents ingrédients, ces autres ingrédients pourraient accentuer ou améliorer la pénétration de l’actif ainsi que ses effets ce qui expliquent la différence de leur efficacité. Le type d’émulsion E/H favoriserait la pénétration la pénétration de l’actif et accentuerait l’hydratation (MARTINI M.C., 2011). L’utilisation de la cire d’abeille dans la phase grasse du masque et de la crème leur procure les propriétés hydrophobe et émolliente. Elle forme un film au niveau de la surface de l’épiderme qui renforce la barrière cutanée empêchant l’évaporation de l’eau, tandis que le gel forme un film brillant au niveau de la surface de la peau après son application. Ce film empêcherait la perte insensible en eau au niveau de la surface cutanée. En ce qui concerne la présentation des trois formulations, elle donne une bonne impression au panel. Dans une formule cosmétique, les critères sensoriels sont visuels, olfactif et tactile. La couleur ainsi que l’odeur attirent les clients. Sa consistance et la sensation qu’il procure lors de son utilisation jouent également un rôle dans l’attirance du client à acheter le produit ainsi que sa fidélité. Nos trois formulations ne sont pas encore mises au point, car elles ont été formulées à partir d’un type de formulation simple et basique, elles doivent être améliorées. Une modification pour l’amélioration d’une formulation complète est nécessaire. Pour les trois produits, l’ajout de parfum est indispensable, tandis que le colorant ne sera introduit que dans le masque et dans la crème parce que leur couleur n’a pas convaincu le panel. Pour améliorer la consistance, l’aspect et surtout les effets de chaque produit, l’apport et le changement au niveau des ingrédients sont proposés. Pour que le produit soit efficace, son association avec d’autres actifs ou ingrédients pouvant accentuer l’effet de l’actif est nécessaire. Pour cela, dans les nouvelles formulations, l’eau sera remplacée par des hydrolats de plantes ou des eaux florales son activité, de plus les eaux florales améliorent l’odeur. La phase grasse sera constituée par un ou de mélanges d’huiles végétales déjà connus pour leur activité anti-âge et contiendra du beurre. Pour rester dans le domaine de la cosmétique « Bio », des huiles essentielles pourront être utilisées comme parfums, et conservateurs (HAMPIKIAN S., 2009). Enfin la texture et la consistance du produit, la proportion entre la phase aqueuse et la phase grasse sera ajustée (Tableaux XVII, XVIII, XIX).
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Table des matières
I. INTRODUCTION
II. MATÉRIELS ET MÉTHODES
A. PARTIE CHIMIQUE
1. Préparation de l’extrait RSA-17
2. Criblage phytochimique
B. PARTIE BIOLOGIQUE
1. Préparation de la crème
2. Préparation du gel
3. Préparation du masque
4. Tests biologiques
a. Animaux d’expérimentation
b. Étude comparative de l’effet des crèmes préparées avec de la cire d’abeille brute et blanchie sur la capacitance cutanée
c. Étude de l’activité de l’extrait RSA-17 sur les rides
d. Étude de l’activité de l’extrait RSA-17 sur l’hydratation cutanée
i. Étude de la variation de la capacitance cutanée chez les animaux traités avec l’extrait
ii. Étude de l’activité de l’extrait RSA-17 sur l’épaisseur de la peau
e. Étude de l’effet de RSA-17 sur l’irritation cutanée et oculaire
i. Étude de l’effet de RSA-17 sur l’irritation cutanée
ii. Étude sur l’irritation oculaire de l’extrait RSA-17
C. PARTIE MARKETING
1. Tests d’évaluation sensorielle
a. Test d’évaluation sensoriel « avant application »
b. Test d’évaluation sensoriel « pendant application »
c. Test d’évaluation sensoriel « après application »
2. Étude du packaging
3. Étude du coût de fabrication aux conditions de laboratoire
4. Étude du circuit et de la stratégie de distribution
III. RÉSULTATS
A. PARTIE CHIMIQUE
1. Rendement de l’extraction
2. Les familles chimiques présentes dans l’extrait RSA-17
B. PARTIE BIOLOGIQUE
1. Effet des deux crèmes de base sur la capacitance
a. Effet des crèmes préparées avec la cire brute et blanchie après application unique sur la capacitance cutanée
b. Effet des deux crèmes de base appliquées deux fois par jour sur la capacitance cutanée
2. Effet de l’extrait RSA-17 sur la formation des rides
3. Effet de l’extrait sur l’hydratation de la peau
a. Effet de l’extrait RSA-17 appliquée une fois sur la capacitance cutanée
b. Effet de l’extrait RSA-17 appliqué deux fois par jour sur la capacitance cutanée
c. Effet de l’extrait RSA-17 sur l’épaisseur cutanée
4. Tolérance cutanée et oculaire de l’extrait RSA-17
a. Tolérance cutanée de l’extrait RSA-17
b. Tolérance oculaire de l’extrait RSA-17
C. PARTIE COSMETOLOGIQUE
1. Résultats des tests sensoriels sur les trois formulations
a. Avant application
b. Pendant application
c. Après application
2. Proposition de packaging
a. Packaging pour la crème
b. Packaging pour le gel
c. Packaging pour le masque
d. Evaluation sensorielle du packaging
3. Coût du masque, de la crème et du gel aux conditions de laboratoire
a. Coût de la crème
b. Coût du gel
c. Coût du masque
4. Circuit de distribution des produits
IV. DISCUSSION
V. CONCLUSION
BIBLIOGRAPHIE
WEBOGRAPHIE
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