PFE & RAPPORT CARACTERISATION CHIMIQUE ET ACTIVITES BIOLOGIQUES DE CONSTITUANTS ISOLES DE TROIS ESPECES DE Croton ENDEMIQUES DE MADAGASCAR PDF
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Table des matières
Liste des figures
Liste des tableaux
INTRODUCTION
Chapitre I : CONTEXTE DE L’ETUDE
I. CADRE DE L’ETUDE
1. Recherche de molécules cytotoxiques: Projet bio-prospection
2. Recherche de molécules contre le virus de Chikungunya : Projet Phytochik
II. APPROCHE DE TRAVAIL
1. Procédés de collecte des plantes
a. Utilisation traditionnelle des plantes
b. Observation des plantes dans leur environnement naturel
c. Aspects botaniques et chimio-taxonomiques
2. Critères de sélection des extraits
a. Criblage biologique
b. Données bibliographiques en phytochimie
3. Plantes sélectionnées
III. ESSAIS BIOLOGIQUES
1. Cytotoxicité et cancer
a. Définition
b. Origine
c. Différents traitements du cancer
d. Recherche de molécules anticancéreuses
2. Inhibition de la réplication du virus chikungunya (CHIKV)
a. Définition et origine
b. Epidémies de CHIKV
c. Symptômes et traitements
d. Recherche de molécules contre le CHIKV
Chapitre II : SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE
I. GENERALITES SUR LES EUPHORBIACEAE
1. Données botaniques
a. Classification des Euphorbiaceae
b. Répartition géographique
c. Critères de reconnaissance
2. Utilisations et intérêts commerciaux des Euphorbiaceae
3. Utilisations traditionnelles des Euphorbiaceae
4. Composition chimique des Euphorbiaceae
II. LE GENRE CROTON
1. Données botaniques
a. Présentation du genre
b. Répartition géographique
2. Utilisations traditionnelles et propriétés pharmacologiques de quelques espèces du genre Croton
a. Antiprolifératifs (anti-tumoral, apoptotique, cytotoxique)
b. Antimicrobiennes (antibactérienne, antifongique, antiviral)
c. Effet antiulcéreux
d. Antioxydant et anti-inflammatoire
e. Antiparasitaires (antipaludique – anti-leishmaniens)
f. Antidiabétique – anti hypercholestérolémie
g. Vasodilatateur – Hypotensive
h. Antineurodégénérative et anticonvulsivants
3. Etudes phytochimiques antérieures et principaux métabolites isolés du genre Croton
a. Diterpènes
b. Monoterpènes et sesquiterpènes
c. Alcaloïdes et flavonoïdes
Chapitre III : MATERIELS ET METHODES
I. LES ESPECES ETUDIEES : C. barorum, C.goudotii, C.chapelieri
1. Classification botanique
2. Descriptions botaniques
a. C. barorum Leandri
b. C. goudotii H
c. C. chapelieri
3. Utilisations dans la médecine traditionnelle
4. Travaux antérieurs sur les espèces étudiées
II. PROTOCOLE DES ETUDES PHYTOCHIMIQUES
1. Chimie extractive
a. Préparation du matériel végétal
b. Macération
2. Méthodes et techniques de purification
a. Déchlorophyllation sur charbon actif
b. Chromatographies
3. Les techniques d’identification structurale
a. Résonance Magnétique Nucléaire (RMN)
b. Spectrométrie ultra-violet (UV)
c. Spectrométrie de masse
e. Pouvoir rotatoire
III. PROTOCOLES DES ESSAIS BIOLOGIQUES
1. Mesure de la cytotoxicité des produits
a. Sur la lignée cellulaire P388
b. Sur les lignées cellulaires KB, HT29, A549, HL60
2. Etude du cycle cellulaire sur la lignée K562 par cytométrie de flux
3. Evaluation de l’inhibition du CHIKV in cellulo
Chapitre IV : ETUDE CHIMIQUE ET ACTIVITE CYTOTOXIQUE DE C. barorum et C.goudotii
I. COLLECTE ET IDENTIFICATION DU MATERIEL VEGETAL
II. EXTRACTION ET ISOLEMENT DES PRODUITS ACTIFS
1. Isolement bioguidé de la partie aérienne de C. barorum
a. Extraction
b. Fractionnement bioguidé et purification
2. Isolement bioguidé de la partie aérienne de C.goudotii
a. Extraction
b. Fractionnement bioguidé et isolement
III. RESULTATS ET DISCUSSIONS
1. Résultats biologiques préliminaires
2. Résultats de l’extraction et de l’isolement
a. Composé C1 : isolé de C. barorum
b. Composé C2 : isolé de C. goudotii
3. Elucidation structurale
a. Structure du composé C1 : Crotobarin isolé du C.barorum
a. Structure du composé C2 : crotogoudin isolé du C.goudotii
4. Hypothèse biogénétique
5. Evaluation de l’activité cytotoxique et étude du cycle cellulaire
a. Evaluation de l’activité cytotoxique
b. Etude de l’influence de crotobarin et crotogoudin sur le cycle cellulaire
6. Conclusion partielle
Chapitre V: ETUDE CHIMIQUE ET ACTIVITE BIOLOGIQUE DE C. chapelieri
I. COLLECTE ET IDENTIFICATION DU MATERIEL VEGETAL
II. EXTRACTION, FRACTIONNEMENT ET ISOLEMENT
1. Extraction
a. Extraction E1
b. Extraction E2
2. Fractionnement bioguidé et isolement
a. Fractionnement de l’extrait E1
b. Fractionnement et isolement bioguidé de l’extrait E2
III. RESULTATS ET DISCUSSIONS
1. Résultats biologiques préliminaires
2. Résultats de l’extraction et de l’isolement
a. Extraction E1 et fractionnement
b. Extraction E2 et isolement des composés C3, C4, C5 et FA-2-1
3. Elucidation structurale
a. Structure du composé C3
b. Structure du composé C4
c. Structure du composé C5
4. Hypothèses biogénétiques
5. Activités biologiques
a. Activité cytotoxique
b. Activité sur l’inhibition du CHIKV in cellulo
6. Conclusion partielle
CONCLUSION GENERALE ET PERSPECTIVES
BIBLIOGRAPHIE ET WEBOGRAPHIE
ANNEXES
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L’étude de la chimie des plantes est toujours d’une brûlante actualité malgré son ancienneté et les développements exponentiels de domaines tels que le criblage à haut débit (high throughput screening ou HTS), la bioinformatique, les approches « omiques » (génomiques, metabolomiques, protéomiques, etc.) pour la découverte de nouveaux médicaments.
Cela tient principalement au fait que les produits naturels constituent une source importante, présumée inépuisable, pour la recherche de composés actifs contre de nombreuses maladies. D’après la revue de Newman et Cragg, 34% des nouveaux anticancéreux développés entre 1981 et 2010 proviennent de produits naturels ou en sont des dérivés .
Cela démontre que la recherche de molécules actives issues de la biodiversité est toujours d’actualité. De plus, l’utilisation thérapeutique des plantes est partie intégrante des traditions de toutes les cultures comme en Chine ou en Afrique . Cette médecine traditionnelle a été la médecine de l’humanité pour des millénaires et continue de l’être pour 80 % de la population mondiale, selon l’OMS .
Les savoirs ancestraux ont été transmis de génération en génération, par voie orale et par écrit. Pour la population Malagasy, les remèdes traditionnels et les plantes médicinales restent courante. Cette pratique est favorisée par la richesse floristique de la biodiversité de notre île : Sur environ 14000 espèces à fleur recensées , plus de 84% y sont endémiques avec 4.000 espèces approximativement ont des valeurs médicinales et presque 50 autres ont été exportées commercialement .
Mais, la valorisation médicinale de ces connaissances passe notamment par l’isolement et l’identification de nouvelles molécules. Ainsi en Juillet 2004, une coopération officielle sous le nom de projet Bioprospection a été établie entre l’ l’Institut de Chimie des Substances Naturelles (ICSN) du Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), le laboratoire
